犬副流感病毒
犬副流感病毒(Canine parainfluenza virus CPIV)是犬传染性呼吸系统疾病主要病因之一。1967年,Binn等从患病犬的呼吸道中首次分离出犬副流感病毒,在此之后全球范围内相继出现有关该病毒的报道,感染范围之广,对世界各地犬群的健康造成了严重的威胁。该病在世界各国普遍存在,是危害犬业重要传染病之一。

病原学
犬副流感病毒形态多样,常见为球形,该病毒于细胞浆中合成,以出芽的方式释放。CPIV的囊膜由细胞外膜的脂类衍生而成,脂蛋白包膜脆弱,容易被破坏。于1972年正式划归副黏病毒科,副黏病毒属。副流感病毒(PIV)属于副黏病毒科,有四个血清型PIV-1、PIV-2、PIV-3、PIV-4。犬副感病毒是单股、不分节段的负链RNA病毒,属于PIV-2血清型。CPIV的名称多样容易被混淆,因为CPIV最初在猴肾细胞中发现但主要与犬的呼吸道疾病有关,因为称SV-5(CPIV-5)。研究发现SV-5与副流感病毒2型(PIV-2)有密切的抗原相关性因而又称CPIV-2,一般认为SV-5与PIV-2属于同一血清型。
犬副流感病毒对甲醛、氧化因子、非离子去污剂和脂溶剂如乙醚、氯仿等敏感,能够很快失活。CPIV对热敏感,50℃放置15 min,病毒可丧失感染力。犬副流感病毒不耐酸和碱,在中性溶液(pH 7.4-8.0)中相对稳定,病毒迅速失去活性的条件是 pH 3.0和37℃。

流行病学
犬副流感病毒的发病率取决于犬的饲养密度,在实验室和军用犬的研究中,有数据显示,犬副流感病毒抗体的流行率从到达犬舍时的3%增加到6周后的72%。易感动物主要为犬。各种年龄的犬均可发生,但幼龄犬病情较重,11-12周龄犬死亡率高,成年犬症状轻,死亡率低。有研究数据显示,华中地区2020年9月-2022年1月收集了418份病料样品通过RT-PCR方法进行CPIV病原检测,阳性率为15.8%,结果低于兰州市2004-2009年间调查得到的37.72%的副流感病毒平均阳性率,导致差异的原因可能是与地区和时间不同有关,PCR能够更灵敏诊断CPIV感染,但是常规免疫接种可能会干扰这种检测,尤其在幼犬中,存在一定的假阳性。
传播途径
该病毒可以在豚鼠、仓鼠、虎、狼、狐、貉等物种中感染并引起呼吸道疾病。患病犬及隐性带毒犬的唾液、呼吸道分泌物以及眼分泌物是主要的传染源,通常病毒粒子会以飞沫的方式在空气中传播。急性期病犬是最主要的传染来源,自然感染途径主要是呼吸道。
CPIV潜伏期通常小于一周,可在出现临床症状前排毒。持续时间约为1周。这意味着受感染的动物在出现临床症状之前就具有传染性,呈现亚临床症状的动物也同样具有传染性。可通过呼吸道分泌物中释放7至14天,导致环境中病原体数量增加,进而极大地增加了疾病传播的可能性。
免疫应答
有研究对犬副流感病毒血清阴性犬的全身抗体反应动力学进行了有限的检查,副流感病毒分离株的HI和VN抗体, HI和VN抗体在感染后7天即可检测到,通常在第21天达到滴度峰值,并持续该水平直至至少第42天。犬对犬副流感病毒的免疫应答是缓慢的,并且在血清抗体应答的速度方面存在一些差异。一些数据报告VN滴度在实验感染后3至4个月会下降至不可检测的浓度。

临床症状
犬副流感病毒感染与感冒临床症状相似,表现发热、咳嗽、流涕、呼吸困难等。但CPIV感染比感冒传播更迅速,爆发也更突然,病犬会出现精神沉郁,干咳,鼻腔分泌物增多,呈浆液性或黏液性。有研究表明,CPIV 也能引起犬的急性脑髓炎和脑内积水,表现为后躯麻癖和运动失调等症状。在大多数情况下,呼吸道疾病无临床症状在或症状非常轻微,有时在7至9天左右,会出现严重的流涕、轻度咽炎和扁桃体炎并持续3~5天,不发烧或体温高干正常1℃~2℃持续数天。实验室检测中CPIV感染的组织学病变包括卡他性鼻炎,粘膜和粘膜下层混合炎性细胞浸润,以及气管支气管炎和细支气管炎,伴有纤毛细胞损失,上皮增生和杯状细胞突出。在组织学检测中检测变化在感染后约 6~12天内最严重。CPIV常与支气管博代菌、2型腺 病毒、霉形体等混合感染,引起犬上呼吸道炎症。
动物剖检的时候可见鼻孔周围有浆液性或黏液脓性鼻漏;结膜炎,扁桃体炎,气管、支气管炎,有时肺部有点状出血。神经型主要表现为急性脑脊髓炎和脑内积水,整个中枢神经系统和脊髓均有病变,前叶灰质最严重。

检测诊断
实验室常用的检测方法有血清中和试验,血凝抑制试验,CPIV抗原检测卡,RT-PCR 方法检测,酶联免疫吸附试验(ELISA),基因芯片检测方法等;
CPIV抗原检测卡可作为诊断CPIV的辅助手段, 快速检测卡以免疫层析法定性地检测犬鼻液中的犬副流感病毒抗原,简单快速、灵敏度高。
RT-PCR方法检测是通过收集病犬的粪便、鼻孔中粘液、咽部分泌物还有一些组织如肺脏、淋巴结和扁桃体等。然后进行病毒分离鉴定,虽然RT-PCR法检测病毒样本具有简单、快速高效的优点,但在健康犬中仍有假阳性情况出现,因此,在疾病的确诊过程中应结合临床症状及其他检测手段综合评判。
基因芯片技术又称微阵列技术,是近年来随着分子生物学的发展而出现的一种新的检测方法,由于其灵敏性高、特异性和重复性好,可以同一时间对大量样品进行检查,所以被广泛应用。该项技术以碱基互相配对为原则,通过目的 DNA 与探针的结合来判断目的 DNA 序列信息,可以快捷、准确地诊断病毒的基因组信息。
血清学实验:取发病初期和恢复期双份血清,利用血清中和试验和血凝抑制试验检测抗体效价是否上升,上升2倍以上者,即可判为犬副流感病毒感染。此法可用作回顾性诊断和进行流行病学调查。
犬呼吸道传染病的临床表现非常相似,不易区别,推荐用PCR检测,采用荧光定量PCR技术直接检测病原体基因,灵敏度显著优于ELISA试剂盒和胶体金试纸条。

预防与控制
主要是加强饲养管理,犬群的密度大小要适中,犬舍周围环境卫生及设施,设施的通风、相对湿度。环境湿度都已严格管理。使用消毒剂进行必要的常规清洁;保持良好的环境卫生;
新购入犬要进行检疫,隔离观察;接种副流感病毒疫苗,美国富道公司和辉瑞公司、荷兰英特威生产的六联苗以及国内夏咸柱等研制生产的五联苗等均包括犬副流感病毒;一旦发现病犬立即采取严格的隔离、消毒措施,注射犬用高免血清或免疫球蛋白来紧急预防,重病犬应当及时淘汰。
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