西山生物

病原体简介

兔艾美耳球虫

病原学

 

兔球虫为顶复门、孢子虫纲、真球虫目、艾美耳科、艾美耳属(Eimeria),寄生于兔肠道或肝脏胆管上皮内的单细胞原生动物。关于家兔球虫的分类曾出现同物异名等混乱状态,至少有25个种被描述和命名。后来随着单卵囊分离技术的发展,以及SPF兔和球虫形态学鉴定(包括孢子化卵囊大小、形态结构、孢子化时间、潜隐期、寄生部位和致病性等特征)的研究,11种球虫经过纯培养和详细鉴定(表1和图1,引自参考文献4),确定为有效种,并且经过18S rRNA基因序列分析验证。这11种球虫分别为斯氏艾美耳耳球虫、梨型艾美耳球虫、黄艾美耳球虫、小型艾美耳球虫、肠艾美耳球虫、中型艾美耳球虫、维氏艾美耳球虫、穿孔艾美耳球虫、大型艾美耳球虫、无残艾美耳球虫、盲肠艾美耳球虫,其中除斯氏艾美耳球虫寄生于胆管上皮细胞内之外,其余各种都寄生于肠粘膜上皮细胞内。

图1 11种兔球虫孢子化卵囊形态结构图

表1 寄生于家兔的11种艾美耳球虫形态学和生物学特性

流行病学

 

兔艾美耳球虫的发育不需要中间宿主,属于直接发育型,但发育过程复杂,无性繁殖和有性繁殖交替发生,包含裂殖生殖、配子生殖和孢子生殖3个阶段。前面2个阶段是在胆管上皮细胞(斯氏艾美耳球虫)或肠上皮细胞(小肠和大肠寄生的各种球虫)内进行的,后一发育阶段是在外界环境中进行的(图4,引自参考文献1)。

图2 斯氏艾美耳球虫(E.stiedai)感染

第7天,第1代成熟裂殖体

图3 斯氏艾美耳球虫(E.stiedai)感染

第11天,成熟小配子体

家兔在吃食或饮水时,吞下成熟的孢子化卵囊。卵囊进入肠道后,在胆汁和胰酶的作用下,子孢子从卵囊溢出,并主动钻入肠(或胆管)上皮细胞。开始变为圆形的滋养体。长大以后细胞核多次分裂变为多核体,最后发育成为球形的裂殖体,内含许多香蕉形的裂殖子。上述过程为第1代裂殖生殖。这些裂殖子又侵入肠(或肝胆管)上皮细胞,进行第2代、第3代,甚至第4代或第5代裂殖生殖。如此反复多次,大量地破坏上皮细胞,致使家兔发生严重的肠炎或肝炎。在裂殖生殖之后,部分裂殖子变为大配子体,部分裂殖子变为小配子体。由大配子体发育成为大配子;在小配子体内发育形成许多小配子。大配子与小配子结合形成合子。合子周围形成卵囊壁,即变为卵囊。卵囊侵入肠腔,并随粪便排到外界,在适宜的温度(20~28℃)和湿度(55%~60%)条件下进行孢子生殖,即在卵囊内形成4个孢子囊,在每个孢子囊内形成2个子孢子。这种发育成熟的卵囊称为孢子化卵囊。

图4 中型艾美耳球虫在兔肠上皮细胞内的发育(A)及在外界环境中的发育(B)

本病的感染途径是通过吃食和饮水。仔兔的感染主要是通过在哺乳时吃入母兔乳房上沾污的卵囊;幼兔的感染主要是通过吃草、吃料或饮水。此外,饲养员、工具、野鼠、苍蝇也可机械地搬运球虫卵囊而传播球虫病。营养不良、兔舍卫生条件恶劣所造成的饲料与饮水遭受兔粪等污染,最易促成本病的发生和传播。成年兔多为带虫者,在幼兔球虫病的传播中起着重要的作用。流行时间视温度和湿度条件而定,一般多在温暖多雨季节流行,如兔舍内温度经常保持在10℃以上时,则随时可发生球虫病。

图5 斯氏艾美耳球虫(E.stiedai)感染9天,肝细胞灶性坏死

球虫对上皮细胞的破坏,有毒物质的产生以及肠道细菌的综合作用是致病的主要因素。病兔的中枢神经系统不断地受到刺激,使之对各个器官系统的调节机能发生障碍,从而呈现出各种临床症状。胆管和肠上皮受到严重破坏时,正常的消化过程陷于紊乱,从而造成机体的营养缺乏,水肿,并出现稀血症和白细胞减少。由于肠上皮细胞的大量崩解,造成有利于细菌繁殖的环境,导致肠内容物中产生大量的有毒物,被机体吸收后发生自体中毒,临床上表现为痉挛、虚脱、肠臌胀和脑贫血等。

图6 斯氏艾美耳球虫(E.stiedai)自然感染兔肝脏纤维组织明显增生肝细胞层状排列

临床症状及病理变化

 

按球虫的种类和寄生部位的不同,将兔球虫病分为3型:肠型、肝型和混合型,临床上所见的多为混合型。其典型病状是:食欲减退或废绝,精神沉郁,动作迟缓,伏卧不动,眼、鼻分泌物增多,唾液分泌增多,口腔周围被毛潮湿,腹泻或腹泻和便秘交替出现。病兔尿频或常作排尿姿势,后肢和肛门周围为粪便所污染。病兔由于肠膨胀,膀胱积尿和肝肿大而呈现腹围增大,肝区触诊有痛感。病兔虚弱消瘦,结膜苍白,可视黏膜轻度黄染。在发病的后期,幼兔往往出现神经症状,四肢痉挛,麻痹,多因极度衰弱而死亡。死亡率一般为40%~70%,有时可达80%。病程为十余天至数周。病愈后长期消瘦,生长发育不良。

图7 兔球虫病的症状(图源网络)

患球虫病的病兔死亡时,尸体外观消瘦,黏膜苍白,肛门周围污秽。肝球虫病时,肝表面和实质内有许多白色或黄白色结节,呈圆形,如粟粒至豌豆大,沿小胆管分布(图8、9,引自参考文献5)。取结节作压片镜检,可以看到裂殖子、裂殖体、配子体和卵囊等不同发育阶段的虫体(图2、3,引自参考文献5)。陈旧病灶中的内容物变稠,形成粉粒样的钙化物质。在慢性肝球虫病时,胆管周围和小叶间部分结缔组织增生,使肝细胞萎缩,肝脏体积缩小(间质性肝炎)(图5、6,引自参考文献5)。胆囊黏膜有卡他性炎症,胆汁浓稠,内含许多崩解的上皮细胞。肠球虫病的病变主要在肠道,肠道血管充血,十二指肠扩张、肥厚,黏膜发生卡他性炎症,小肠内充满气体和大量黏液,黏膜充血,上有溢血点。在慢性病例,肠黏膜呈淡灰色,上有许多小的白色结节,压片镜检可见大量卵囊,肠黏膜上有时有小的化脓性、坏死性病灶。

图8 斯氏艾美耳球虫(E.stiedai)感染的肝脏

图9 斯氏艾美耳球虫(E.stiedai)感染形成的肝脏结节病灶

影响

 

兔球虫病是家兔中最常见的一种寄生虫病,对养兔业的危害极大。目前国内的主要流行种为大型艾美耳球虫、中型艾美耳球虫、肠艾美耳球虫,不同地区的流行优势种有一定差异。据研究,黄艾美耳球虫、斯氏艾美耳球虫、肠艾美耳球虫为兔球虫中强致病性虫种,大型艾美耳球虫、梨形艾美耳球虫、中型艾美耳球虫、维氏艾美耳球虫、无残艾美耳球虫为中等致病性虫种,小型艾美耳球虫、穿孔艾美耳球虫轻微致病,盲肠艾美耳球虫无致病性。

各品种的兔子对艾美耳球虫都易感,尤其是断奶至4月龄的幼兔,其感染率和死亡率均处于较高水平;成年兔则转为长期带虫体,不断向外界环境散播球虫卵囊。即使是长期用药,兔子的球虫感染率仍然居高不下,给养兔业带来了巨大的损失。

近三年本实验室兔球虫总计检测样本量为105份,其中阳性样本45份,阳性率为42.86%。

诊断

 

先根据流行病学资料、临床症状及病理剖检结果,做出初步诊断,饱和盐水漂浮法检查粪便中的卵囊或将肠黏膜刮取物及肝脏病灶刮屑物制成涂片,镜检球虫卵囊、裂殖体或裂殖子等,如在粪便中发现大量卵囊或在病灶中发现大量各个不同发育阶段的球虫,即可确诊为兔球虫病。

预防和治疗

 

目前兔球虫病的治疗和预防以药物为主,针对兔球虫的疫苗也有相关研究。可用下列药物进行治疗或预防:

(1) 磺胺六甲氧嘧啶(SMM),按0.1%的浓度混入饲料中,连用3~5天,隔1周,再用一个疗程。

(2) 磺胺二甲基嘧啶(SM2)与三甲氧苄氨嘧啶(TMP) ,按5:1混合后,以0.02%的浓度混入饲料中,连用3~5天,停1周后,再用一个疗程。

(3) 100mg/kg克球粉(Clopidol) 和8.35mg/kg的苄喹硫酯(Methylbenzoquate) 合剂,商品名为Lerbek。以此剂量混饲,可使卵囊排出量减少80%,增重率提高41%。

(4) 氯苯胍(Robenidine),按30mg/kg体重混入饲料中连用5天,隔3天后再重复一次。

(5) 杀球灵(Diclazuril),按1mg/L浓度混入饲料中,连用1~2个月,可预防兔球虫病。

(6) 莫能菌素(Monensin),按40mg/L浓度混入饲料中,连用1~2个月,可预防兔球虫病。

(7) 盐霉素(Salinomycin),按50mg/L浓度混入饲料中,连用1~2个月,可预防兔球虫病。

也应采取一些综合措施进行预防。养兔场应建在干燥向阳处,兔场要保持干燥,兔舍应保持清洁和通风;幼兔和成年兔分笼饲养,发现病兔立即隔离治疗;加强饲养管理,注意饲料及饮水卫生,及时清扫粪便,防止兔粪污染草料和饮水;最好使用铁丝兔笼。笼底应有网眼,使粪尿流入下面的底盘之中。对免笼等可用开水、蒸汽或火焰进行消毒,或将兔笼放在阳光下暴晒以杀死卵囊;合理安排母兔的繁殖,使幼兔断奶不在梅雨季节;在球虫病的流行季节里,对断奶的仔兔,可在饲料中拌入药物,用以预防兔球虫病。

参考文献

 

1 . 《家畜寄生虫学(第二版修订版)》 孔繁瑶主编

2 . 《兽医寄生虫学(第三版)》汪明主编

3 . 王新秋,刘丽丹,廖贵城,刘园,黄仪娟,曾莉,翁亚彪. 兔球虫流行病学调查与防控技术研究进展[J]. 中国养兔,2018,(01):14-17+13.

4 . 闫文朝,索勋,薛帮群. 国内外家兔球虫病研究现状[J]. 中国养兔,2011,(05):21-26.

5 . 《动物寄生虫病彩色图谱(第二版)》 李祥瑞主编